<thead id="y2tqq"><ruby id="y2tqq"></ruby></thead>
        <acronym id="y2tqq"><em id="y2tqq"><dfn id="y2tqq"></dfn></em></acronym><acronym id="y2tqq"><li id="y2tqq"><address id="y2tqq"></address></li></acronym>
            你的位置:首頁 > 產品展示 > 試劑耗材 > 試劑 > Polysciences 24765-1試劑
            Polysciences 24765-1試劑

            Polysciences 24765-1試劑

            更新時間:2024-06-12

            產品特點:
            Polysciences 24765-1試劑,細胞轉染在基因表達和蛋白質研究領域至關重要。Polysciences 24765-1,作為一種有效的轉染試劑,能夠高效地將DNA引入細胞內。本文將詳細介紹Polysciences 24765-1的使用方法。
            產品介紹
            品牌其他品牌產地進口
            加工定制

            一、貼壁細胞轉染:Polysciences 24765-1試劑

            以293T細胞為例,需要精確控制轉染條件以確保*高效率。以下是具體步驟:

            細胞準備:

            使用膠原酶處理細胞并計數。在6孔板中以每孔2×106細胞接種。每孔加入2 mL新鮮的DMEM/F12+5%FBS 培養基和1 mL的細胞懸液,置于37℃,5%CO2培養箱培養24 h。24 h后,移除之前培養基,每孔加入2 mL新鮮的DMEM/F12+5%FBS。

            轉染過程:

            1.檢查細胞匯合度,達到70%-80%時開始轉染。

            2.分別用兩份100 µL無血清培養基稀釋DNA,使DNA終濃度為1 µg/ml(DNA/總培養體積)和適當比例的適量Polysciences 24765-1。DNA:PEI 的比例要依據自己實驗摸索最適比例。

            3.將稀釋的Polysciences 24765-1轉染試劑與質粒(總體積200 µL)輕輕混勻,室溫孵育30 分鐘。

            4.PEI-DNA 復合物滴加到細胞培養板每個孔中,輕搖混勻。注意輕輕沿著孔板邊緣滴入,以免破壞細胞的粘附性。

            5.將培養板放入37℃,5%CO2培養箱培養中培養24 h。

            結果觀察:

            在24小時后使用熒光顯微鏡觀察轉染效果,超過80%的293T 細胞在轉染后的24 h可以觀察到綠色熒光。

            二、懸浮細胞轉染:Polysciences 24765-1試劑

            懸浮細胞轉染步驟略有不同,小規模轉染時,用新鮮的培養基重懸浮,使細胞密度達到 1×106cells/mL,如需大規模轉染細胞密度要到達2-3×106cellsml/mL。

            以293F細胞為例:

            細胞準備:

            傳代接種于20 mL 懸浮細胞生長培養基中(36.5℃,120 rpm,5%CO2 )培養細胞至1×106 cells/mL的密度,旋緊瓶口放入搖床,2~4 小時后可以進行轉染。

            轉染過程:

            1.用1 mL無血清培養基稀釋適量的DNA,使DNA 終濃度為1 µg/ml,混勻并靜置5 min。

            2.用1 mLOptiPRO

            SFM(無血清培養基)稀釋適當比例的PEI 40000,混勻并靜置10 min。

            3.將稀釋的24765-1轉染試劑與質粒輕輕混勻,室溫孵育30分鐘。

            4.將PEI-DNA 轉染復合物逐滴加入到細胞培養液中,搖勻后旋緊瓶口放回搖床(36.5℃,5%CO2,120 rpm)。

            5.基因表達可在24-72小時后檢測,時間取決于細胞系和轉基因。



            更多產品
            在線留言

            留言框

            • 產品:

            • 您的單位:

            • 您的姓名:

            • 聯系電話:

            • 常用郵箱:

            • 省份:

            • 詳細地址:

            • 補充說明:

            • 驗證碼:

              請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7

            滬公網安備 31011502010451號

            久久99国产亚洲高清观看韩国|欧美肥屁VIDEOSSEX精品|久久青青91费线频观青|色一情一乱一伦一区二区|欧美国产在线播放气质

                <thead id="y2tqq"><ruby id="y2tqq"></ruby></thead>
                  <acronym id="y2tqq"><em id="y2tqq"><dfn id="y2tqq"></dfn></em></acronym><acronym id="y2tqq"><li id="y2tqq"><address id="y2tqq"></address></li></acronym>